梅毒試紙的準確率一般在85%-95%之間，實際檢測結果受試紙品牌、操作規范性、感染階段、樣本類型、檢測時機等因素影響。
市售梅毒試紙多采用膠體金免疫層析法，對梅毒螺旋體抗體進行檢測。主流品牌試紙對一期梅毒的檢出率約70%-85%，二期梅毒可達95%以上，潛伏期梅毒約90%。血液樣本準確率通常高于唾液樣本，靜脈血檢測優于指尖采血。
操作不當可能導致假陰性或假陽性。采血量不足、加樣時間過長、結果判讀超時等操作失誤會降低準確性。窗口期感染后2-4周內檢測可能出現假陰性，此時需結合梅毒螺旋體明膠凝集試驗TPPA或化學發光法復檢。
自身免疫疾病患者可能出現假陽性，需通過梅毒甲苯胺紅不加熱血清試驗TRUST或快速血漿反應素試驗RPR驗證。試紙檢測陽性者應到皮膚性病科進行專業實驗室確診，陰性結果但存在高危行為者建議間隔4周復測。
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