陰道內(nèi)未檢出DNA可能由樣本采集不當(dāng)、檢測(cè)時(shí)間過長、精液量過少、陰道環(huán)境破壞、檢測(cè)技術(shù)局限等因素引起。
1、樣本采集問題:陰道內(nèi)DNA提取需規(guī)范采集宮頸分泌物或陰道后穹窿樣本,使用無菌拭子旋轉(zhuǎn)刮取黏膜細(xì)胞。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致細(xì)胞脫落不足,建議由專業(yè)人員使用專用采樣套裝,避開月經(jīng)期和沖洗后48小時(shí)內(nèi)采集。

2、降解時(shí)間影響:精液DNA在陰道內(nèi)留存時(shí)間受陰道pH值、酶活性及分泌物影響。酸性環(huán)境pH3.8-4.5中,精子DNA通常在12-72小時(shí)降解,超過窗口期可能無法檢出。性行為后立即檢測(cè)可提高檢出率。
3、精液參數(shù)異常:少精癥精液量<1.5ml或無精癥患者,精液中精子數(shù)量低于檢測(cè)閾值。這類情況需結(jié)合精液分析報(bào)告,必要時(shí)采用Y染色體STR檢測(cè)等敏感技術(shù)。
4、陰道微生態(tài)改變:頻繁灌洗、使用殺精劑或陰道炎如細(xì)菌性陰道病會(huì)破壞精子完整性。乳酸桿菌過度增殖產(chǎn)生的過氧化氫,或滴蟲性陰道炎的蛋白酶均可加速DNA分解。
5、檢測(cè)方法局限:常規(guī)STR檢測(cè)需200-400個(gè)細(xì)胞,微量DNA需采用全基因組擴(kuò)增或下一代測(cè)序技術(shù)。陳舊樣本可嘗試線粒體DNA檢測(cè),但需排除混合樣本干擾。

日常保持外陰清潔但避免陰道沖洗,性行為后6小時(shí)內(nèi)就診可保留檢測(cè)證據(jù)。穿棉質(zhì)內(nèi)褲維持pH平衡,急性炎癥期需先治療感染。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)規(guī)范樣本運(yùn)輸流程,冷藏保存不超過72小時(shí),采用硅膠膜法提取可提高微量DNA捕獲率。





