一天中任何時間服用葉酸均可，建議固定時間服用以形成規律。
葉酸屬于水溶性維生素，人體吸收不受飲食影響，空腹或餐后服用均不會影響其生物利用度。考慮到個體作息差異，早晨服用可避免遺忘，晚間服用則有助于減少部分人群可能出現的輕微胃腸道不適。備孕及妊娠期女性需特別注意每日補充400-800微克葉酸，普通成人日常需求量為200微克。
備孕女性應在孕前3個月開始補充，持續至妊娠滿3個月。哺乳期女性每日需增加100微克攝入量。長期服用抗癲癇藥物、甲氨蝶呤等特定藥物者，需在醫生指導下調整劑量。酒精依賴人群因代謝障礙需增加葉酸攝入。
富含葉酸的食物包括動物肝臟、深綠色蔬菜、豆類及全谷物。烹飪時避免長時間高溫加熱，建議采用急火快炒或涼拌方式。規律補充葉酸期間應避免同時大量攝入維生素C制劑，以防影響吸收效率。建議每半年檢測一次血清葉酸水平，尤其對于長期素食或消化吸收功能減退者。適度運動可促進葉酸代謝，但需避免劇烈運動后立即服用。
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